محیط کشت باکتری‏ها
به منظور کشت باکتری‏ها، در تمامی موارد از محیط کشت LB به‏صورت جامد و مایع استفاده شد. تریپتون، عصاره مخمر، سدیم کلراید و آب ترکیباتی هستند که در تهیه‏ی LB مایع مورد استفاده قرار می‏گیرند، با افزودن آگار به محیط LB مایع، حالت جامد از محیط مذکور بدست می‏آید. محیط کشت به مدت ۱۵ دقیقه در دمای ۱۲۱درجه سانتیگراد اتوکلاو شد. در صورت نیاز به آنتی بیوتیک، بعد از اینکه دمای محیط کشت اتوکلاو شده به زیر ۵۰ درجه سانتی گراد رسید، آنتی بیوتیک لازم به صورت استریل به محیط اضافه شد(سمبروک و راشل،۲۰۰۱).
آنتی‏بیوتیک‏ها
با بهره گرفتن از روش‏های استاندارد، آنتی‏بیوتیک‏های مورد استفاده با غلظت مناسب تهیه و در میکروتیوب‏های ۵/۱ میلی لیتری تقسیم‏بندی گردید و در ۲۰- درجه سانتی‏گراد نگهداری شد. آنتی‏بیوتیک آمپی‏سیلین (mg/ml 75) به‏عنوان نشانگر انتخابی برای پلاسمیدهای pGEM7zf(-) و همچنین pUCI9 و کانامایسین (mg/ml 50) برای پلاسمید pBI121 مورد استفاده قرار گرفت، به‏علاوه به منظور گزینش آگروباکتریوم نیز از آنتی‏بیوتیک ریفامپسین (mg/ml 75) استفاده شد.

برای تهیه محلول‏های مادری آنتی‏بیوتیک، معمولاً از آب استریل استفاده شد که بعد از حل کردن پودر آنتی‏بیوتیک‏ها، در شرایط استریل فیلتر (فیلتر ۲۲/۰ میکرومتر) می‏شوند. حلال ریفاپسین برخلاف آمپی‏سیلین و کانامایسین که آب می‏باشد، متانول است که در آن صورت نیازی به فیلتر ندارد. پلیت‏های آنتی‏بیوتیک تا یک هفته قابل نگهداری در یخچال می باشند (سمبروک و راشل،۲۰۰۱).
طراحی آغازگر^[۵۹]
برای انجام مراحل مختلف تکثیر و یا تاییدهای مولکولی بر مبنای PCR و تعیین توالی، آغازگرهای اختصاصی طراحی شدند. آغازگرهای اختصاصی hrpW و hrpG برای تکثیر و جداسازی دو ژن مورد نظر از ژنوم باکتری xcc به گونه‏ای طراحی شدند که آغازگرهای رفت علاوه بر پوشش چند نوکلئوتید ابتدای ژن به همراه کد آغازین در انتهای ‘۵ خود دارای سایت برش XbaI و همچنین ۲ نوکلئوتید اضافه بر آن بعنوان Overhang می‏باشد، اما در مورد آغازگرهای برگشتی دارای جایگاه‏های برش مختلف هستیم، به گونه‏ای که در آغازگر برگشتی مربوط به hrpW سایت SacI و در مورد آغازگر برگشتی hrpG جایگاه BamHI قرار می‏گیرد، علاوه بر این همچنین آغازگر برگشتی hrpW دارای کدون خاتمه بوده در صورتی که این کدون در آغازگر برگشتی مربوط به hrpG به جهت حفظ و بیان gus در وکتور بیانی، حذف شده است. ویژگی‏ها و ساختارهای ثانویه احتمالی تمامی آغازگرها با کمک نرم افزار Oligo7 بررسی شد و بهترین ترادف‏ها سفارش داده شدند.
ترادف آغازگرهای به‏کار رفته در این تحقیق در جدول زیر آمده است. لازم به ذکر است که علاوه بر دو جفت پرایمر مذکور از دو جفت پرایمر دیگر تحت عنوان Xac01 و Xac02 و همچنین MS⁺ وMS^- گرفته شده از منابع علمی موجود در راستای شناسایی باکتری مورد مطالعه، جهت تایید A* بودن و در نتیجه گزینش باکتری هدف از بین کلکسیون باکتری‏های زانتوموناس در قالب پاتووارهای مختلف، موجود در مرکز ملی مهندسی ژنتیک بهره گرفته شد. سنتز پرایمر‏ها توسط شرکت تکاپوزیست صورت پذیرفت.
جدول۱-۲- مشخصات آغازگر‏های اختصاصی برای تکثیر و شناسایی

۱-۳-۱- ساختار sI
سلول واحد ساختار sI، یک مکعب با ابعاد Å۱۲ است که شامل دو نوع قفس کوچک و بزرگ می­باشد. دو قفس کوچک، دوازده­وجهی پنج­ضلعی هستند، در حالی که شش قفس بزرگ­تر، به­ صورت چهارده­وجهی هستند که دوازده وجه آن، پنج­ضلعی و دو وجه آن، شش­ضلعی می­باشند که این دو وجه شش­ضلعی روبه­روی هم قرار دارند. حفره­‌های کوچک با شعاع Å ۵/۳ تقریباً کُروی و حفره­‌های بزرگ با شعاع Å ۳۳/۴ تخم­مرغ شکل می­باشند[۳].
شکل (۱- ۴) شکل حفره­ها در ساختار sI ]3[
۱-۳-۲- ساختار sII
سلول واحد ساختار sII شامل یک مکعب به ابعاد Å۳/۱۷ می­باشد که هر واحد ساختمانی آن از ۱۳۶ مولکول آب و ۲۴ حفره برای مولکول­‌های گاز (کوچک و بزرگ) تشکیل شده است. ۱۶ حفره‌­ی کوچک ۱۲ وجه پنج ضلعی و ۸ حفره‌­ی بزرگ شانزده وجهی هستند که شامل ۴ وجه شش­ضلعی و ۱۲ وجه پنج ضلعی می­باشند[۳].

شکل (۱- ۵) شکل حفره­ها در ساختار sII [3]
۱-۳-۳- ساختار sH
سلول واحد این ساختار، یک شبکه­‌ی شش وجهی است که هر واحد ساختمانی آن از ۳۴ مولکول آب و ۶ حفره برای مولکول‌­های گاز (حفره‌­ی کوچک، بزرگ، متوسط) تشکیل شده است. ۳ حفره‌­ی کوچک ۱۲ وجه ۵ ضلعی است که ساختار­‌های قبلی نیز آن را دارا می­باشند، و یک حفره­‌ی بزرگ ۱۲ وجه ۵ ضلعی و ۸ وجه شش ضلعی است و دو حفره با اندازه‌­ی متوسط و کمی بزرگتر از حفره‌­ی کوچک، که یک ۱۲ وجهی (۳ وجه چهار­ضلعی، ۶ وجه پنج ضلعی و ۳ وجه شش ضلعی) می­باشد [۳].
شکل (۱- ۶) شکل حفره­ها درساختار sH [3]
بر­خلاف sI، sII که معمولاً به­سهولت یک مهمان در قفس بزرگ و یا قفس کوچک می­پذیرند، تمام هیدرات­‌های گازی sH حداقل دارای دو نوع مهمان هستند. همچنین تحقیقات آزمایشگاهی پیش ­بینی می­ کند که هیدرات­‌های گازی sH می­توانند در دما‌­های بالاتر و فشار کمتری در مقایسه با sI و sII تشکیل شوند، که باعث اهمیت این ساختار می­ شود[۳].
۱-۳-۴- نکاتی مربوط به ساختار­‌های هیدرات
هیدرات‌­های گازی طبیعی، به­ طور معمول در ساختار مکعبی sI، ساختار مکعبی sII یا در ساختار sH تشکیل می­شوند.
پیوند هیدروژنی اساس بر­همکنش‌­های پیوند مولکول‌­های آب در ساختار چهار­ضلعی شبیه به یخ است. خوشه­‌های آب پنج و شش­ضلعی به وسیله­‌ی پیوند هیدروژنی تشکیل می­شوند که بار­ها در آب یافت می­شوند. خوشه­‌های مربع در فواصل کمتر وجود دارند[۶].
یک حفره‌­ی مشترک ساختار­‌های هیدرات، دوازده­وجهی پنج­ضلعی است.
فضا­‌های بین حفره­‌های ۵^۱۲ بزرگتر از حفره­‌های ۵^۱۲۶^۲ در ساختار sI، یا حفره­‌های ۵^۱۲۶^۴ در ساختار sII هستند. در ساختار sH، هر دو حفره‌­ی بزرگ (۵^۱۲۶^۸) و حفره­‌های متوسط (۴^۳۵^۶۶^۳) بین لایه­‌های حفره­‌های ۵^۱۲ شکل گرفته­اند.
مولکول­‌های کوچک علاوه بر اشغال کردن حفره­‌های کوچک، حفره­‌های بزرگ را نیز اشغال می­ کنند. مولکول­‌های بزرگ تنها با اشغال حفره­‌های بزرگ می­توانند ساختار­‌های sI و یا sII را پایدار کنند. در ساختار H لازم است که هر دو حفره‌­ی بزرگ و کوچک اشغال شوند.
اشغال حفره­‌های هیدرات و ساختار هیدرات به میزان زیادی توسط اندازه‌­ی مهمان در ساختار sI و sII تعیین می­ شود. در ساختار sH، اندازه و شکل برای مولکول مهمان ضروری است. بر­همکنش­‌های دافعه‌­ی بین مهمان و میزبان باعث پایداری ساختار هیدرات می­ شود. نسبت اندازه‌­ی مهمان به حفره یک راهنمای کلی برای تعیین ساختار­‌های بلوری و اشغال قفس است [۶].
۱-۴- مشخصات مولکول مهمان
هیدرات‌­های گازی بر اساس مولکول مهمان نیز تقسیم شده ­اند. این تقسیم ­بندی بر اساس دو عامل ماهیت پیوند شیمیایی مولکول مهمان و اندازه و شکل آن صورت می­گیرد [۷]. جفری^[۸] با این بیان که مولکول­‌های مهمان نمی ­توانند شامل یک یا تعدادی از گروه­‌هایی با پیوند هیدروژنی نسبتاً قوی باشند، آن­ها را بر اساس ماهیت شیمیایی طبقه ­بندی کرد. مولکول‌­های ترکیبات گاز طبیعی دارای پیوند هیدروژنی نیستند و بنابر­این ماهیت شیمیایی آن­ها یک محدود­کننده نمی ­باشد. در یک بررسی مروری از مولکول­‌های مهمان در هیدرات‌­های گازی، دیوید­سون^[۹] بیان کرد در صورتی که محدودیت‌­های ماهیت شیمیایی رعایت شود، تمام مولکول­‌هایی که بین اندازه‌­ی آرگون Å (۸/۳) و سیکلو بوتان Å (۵/۶) قرار می­گیرند، می­توانند هیدرات­‌های sI و sII تشکیل دهند [۸].
۱-۵- هیدرات­های گازی در طبیعت
دانشمندان روسی با بهره­ گیری از روش­های نظری در سال ۱۹۷۰ محاسبه کردند که باید رسوبات طبیعی هیدرات­های گازی در سطح زمین وجود داشته باشند. هنگامی که در سال ۱۹۸۰ نمونه­های هیدرات گازی از کف دریا توسط کشتی­های روسی و همچنین در فلات قاره­ی آمریکا توسط کشتی­های حفاری بازیافت گردید، این تئوری تأیید شد. در اواخر قرن بیستم، برخی مباحث مهم و جهانی و بسیاری از کشور­ها را بر این داشت که برنامه تحقیقاتی بین المللی برای تحقیقات در زمینه­ هیدرات­های گازی طرح نمایند. مهمترین این اقدامات توسط کشور­های ژاپن، کانادا، آمریکا و هند انجام شد[۱۶]. تخمین­های بسیار متنوعی در مورد میزان منابع جهانی هیدرات­های وجود دارد و اغلب پیش ­بینی می­ کنند که هیدرات­های گازی با سایر منابع گاز طبیعی، به­ صورت ترکیب شده وجود دارند.
پیش ­بینی­های اخیر از مقدار حجم گازی که در هیدرات­های گازی محبوس شده است، در محدوده صد هزار تا یک میلیون تریلیون فوت مکعب خبر می­دهد. اگر فقط ۵ درصد از مخازن گازی هیدراته قابل برداشت باشند، مقدار آن به مقدار گاز­های پیش ­بینی شده قابل برداشت از منابع گازی غیر­هیدراته خواهد رسید. در شکل (۱-۷) منابع هیدرات­های گازی نسبت به سایر منابع هیدرو­کربنی نشان داده شده است[۱۶].
هیدرات­های گازی دور­تا­دور کره­ی زمین، خارج از رسوبات پوسته­ای قاره­ها، در اعماق بیش از ۵۰۰ متر و در جا­هایی که دما فقط چند درجه بالاتر از نقطه انجماد آب است و همچنین در بسترهای قطبی یافت می­شوند. منطقه پایداری هیدرات گازی^[۱۰]، یعنی محلی که هیدرات­های گازی پایدار هستند، بستگی به دما، فشار، تغییرات گرمایی، حجم و ترکیب درصد گاز دارد. عوامل فوق، محدوده­ای که منطقه پایداری هیدرات گازی تشکیل می­ شود، را هم کنترل می­ کنند. در شکل (۱-۸) منابع پیش ­بینی شده و کشف­شده هیدرات­های گازی در کره­ی زمین نشان داده شده است[۱۶].
هیدرات متان یکی از بالقوه­ترین منابع گازطبیعی در آینده نزدیک است زیرا مقادیر عظیمی از مخازن آن به شکل هیدرات­های گازی در رسوبات دریایی و مناطق لجنی سراسر دنیا وجود دارد. هر چند هیدرات­های گازی هیدرو­کربن­هایی دارند که تمام آن­ها بی­رنگ نیستند. بعضی از هیدرات­های گازی اعماق خلیج مکزیک در طیف­های زرد، نارنجی، و حتی قرمز، به شدت رنگی هستند[۱۵].
شکل (۱- ۷) توزیع کربن آلی در منابع زمین ) بجز در صخره­ها( بر­حسب گیگا تن [۱۶]
شکل (۱- ۸) منابع پیش ­بینی شده و کشف شده هیدرات­های گازی در کره­ی زمین [۱۶]
۱-۶- اهمیت هیدرات‌­های گازی
تشکیل هیدرات، چه به­عنوان یک پدیده‌­ی مضر در خطوط انتقال گاز و چه کاربرد‌­های آن در نگهداری و انتقال یا جدا­سازی مواد گوناگون مدّ نظر محققان است.
۱-۶-۱- مزایای هیدرات گازی
از مزایای هیدرات‌­های گازی می­توان به انتقال گاز طبیعی، منبع مهم انرژی و کاربرد آن در صنعت غذایی اشاره کرد.
۱-۶-۱-۱- انتقال گاز طبیعی
در طول ۲۰ سال اخیر منابع اثبات شده گاز طبیعی در حدود دو برابر افزایش یافته است. ولی بیشتر میادین گاز طبیعی در جهان به طور معمول در نقاطی واقع شده ­اند که از بازار مصرف دور هستند. همچنین هزینه­ های مربوط به تولید، فراوری و مهمتر از آن انتقال گاز طبیعی زیاد است و به صورت عاملی باز­دارنده ظاهر می­ شود.
گاز طبیعی به طور عمده از متان تشکیل شده است، بنابر­این بررسی شرایط تشکیل هیدرات متان به شرایط هیدرات گاز طبیعی بسیار نزدیک است. بهترین گزینه برای ذخیره­سازی بیشترین حجم متان ساختار sIاست که میزان ذخیره­سازی آن ۲۲۴ متر مکعب به ازای هر متر مکعب هیدرات متان در شرایط استاندارد است. زیرا متان می ­تواند هر دو قفس کوچک و بزرگ این ساختار را اشغال کند ولی برای تشکیل هیدرات متان خالص به این صورت، نیاز به فشار زیادی است. از طرفی، وجود گاز­هایی مانند پروپان که ترکیب گاز طبیعی وجود دارند منجر به پیدایش ساختار sII خواهد شد، بنابر­این به منظور کاهش فشار بسیار بالای تشکیل هیدرات گازی متان می­توان با یک افزودنی مناسب که توانایی نشستن در قفس­های بزرگ این ساختار را دارد، فشار تشکیل هیدرا ت گازی را کاهش داد. این افزودنی­های مناسب می ­تواند برای مثال اتیلن­اکسید برای ساختار sIو تترا­هیدر­وفوران برای ساختار sII باشد که توانایی اشغال قفس­های بزرگ این ساختار را دارند و متان نیز در قفس­های کوچک تر این ساختار­ها می­نشیند. به این ترتیب فشار تشکیل هیدرات گازی کاهش می­یابد[۹].
بعد از کشف هیدرات، استفاده از هیدرات جهت ذخیره­سازی و انتقال گاز به­ صورت جدی مطرح گردید. این خاصیت به هیدرات اجازه می­دهد که در فشار پایین­تر از فشار تشکیل آن پایدار بماند. بعد از تشکیل هیدرات در فشار بالا آن را تا زیر صفر درجه‌­ی سانتی ­گراد سرد می­ کنند و فشار را به فشار اتمسفر کاهش می­ دهند. در این صورت، اگر به آن گرما نرسد (شرایط آدیاباتیک) هیدرات تجزیه نمی­ شود. در واقع از سطح هیدرات تجزیه می­گردد. آبِ به ­وجود آمده یخ می­زند و مانند لایه محافظی اطراف آن را می­پوشاند و مانع تجزیه­‌ی بیشتر آن می­گردد [۹].
۱-۶-۱-۲- منبع انرژی
امروزه مخازن بزرگ هیدرات حاوی متان کشف شده که می ­تواند به­عنوان منبع جدید انرژی در آینده استفاده گردد. هیدرات گازی می ­تواند مقدار بسیار زیادی از گاز را در خود حبس کند. پیش ­بینی می­ شود هیدرات گازی کشف­شده در دنیا، حدود ۱۰۰ گیگا تُن کربن می­باشد که این مقدار به تقریب دو برابر مقدار کل کربن موجود در سوخت‌­های فسیلی در کره‌ی زمین است [۱۰].
۱-۶-۱-۳- جدا­سازی دی­اکسید­کربن
حدود ۶۴ درصد از اثر افزایش گاز‌­های گلخانه­ای به دلیل انتشار دی­اکسید­کربن است که بیش از ۶ گیگا تن بر­سال است و به فعالیت‌­های انسانی نسبت داده شده است. با توجه به این که اثر گلخانه­ای باعث گرم شدن کره‌­ی زمین می­ شود، کاهش مقدار دی­اکسید کربن منتشر شده در داخل جو چالش عمده‌­ی محیط زیست است. دی­اکسید­کربن را می­توان تا حدودی با بهره گرفتن از روش­‌های مختلفی همچون جذب شیمیایی در آمین یا جدا­سازی در لایه‌­ی میانی زمین و اقیانوس­ها به دام انداخت. این قبیل روش­ها را می­توان با انتشار دی­اکسید­کربن در آب و با بهره گرفتن از یک فرایند سازگار، با تزریق به عمق آب انجام داد. دی­اکسید­کربن تا عمق ۴۰۰ متری به آب تزریق می­ شود و پس از آن با انحلال در آب به دام افتاده می­ شود. در عمق بین ۱۰۰۰ و ۲۰۰۰ متر، دی­اکسید­کربن می ­تواند در آب دریا به­ طور غنی ظاهر شود و سپس با توجه به چگالی خود، در اعماق دریا ته­نشین شود، که در این­جا دی­اکسید­ کربن به مدت طولانی ثابت می­ماند. جدا­سازی دی­اکسید­کربن دریایی در حال حاضر در مرحله‌­ی آزمایش است و تحقیقات بیشتر در زمینه‌­ی حلالیت دی­اکسید­کربن، سرعت تشکیل هیدرات‌­های دی­اکسید­کربن و ثبات هیدرات دی­اکسید­کربن در حال انجام است [۱۱].
۱-۶-۱-۴- هیدرات­‌های گازی در صنعت غذایی
بلور­‌های هیدرات گازی فقط شامل آب خالص و مولکول مهمان هستند و ترکیب مواد تشکیل­دهنده‌­ی هیدرات گازی در بلور با مخلوط اولیه متفاوت است و این به­عنوان پایه‌­ی جدا­سازی مواد قرار می­گیرد. تشکیل بلور­‌های هیدرات در دمای بالاتر از نقطه‌­ی انجماد نرمال آب صورت می­گیرد که این مسئله باعث صرفه­جویی انرژی می­ شود. در نهایت مواد بلورشده به­ طور فیزیکی توسط سانتریفیوژ­‌های سبدی از محلول تغلیظ­شده جدا می­شوند. در نهایت بلور­‌های جدا شده با بالا­بردن دما و یا کاهش فشار یا ترکیب این دو عامل به آب و گاز تجزیه شده و گاز برای تشکیل هیدرات گازی بعدی وارد خط تولید خواهد شد.
۱-۶-۱-۴-۱- تغلیظ آب میوه­ ها
از هیدرات گازی برای تغلیظ آب میوه­‌هایی نظیر سیب، پرتقال، گوجه­ فرنگی تا گرفتن آب به میزان ۸۰ درصد استفاده می­گردد. تغلیظ محلول­‌های عصاره‌­ی قهوه، نیشکر، نمک طعام با تشکیل هیدرات گازی به­وسیله‌ی اکسید­اتیلن، تری­کلرو­فلوئور­متان، اکسید­پروپیلن، دی­اکسید­فلوئور و متیل­کلراید صورت می­گیرد. همچنین در صنایع قند و شکر این فرایند می ­تواند جایگزین فرایند تبخیر که انرژی بالایی دارد، شود.
۱-۶-۱-۴-۲- شیرین­سازی آب دریا
در فرایند شیرین­سازی آب دریا با هیدرات گازی، گاز در فشار بالا به آب دریای نسبتاً سرد تزریق می­ شود. مولکول‌­های آب و گاز ساختار شبکه‌­ای قفس مانندی را به وجود می­آورد که ناخالصی­ها و نمک به آن نمی­تواند وارد شوند. بلور­‌های هیدرات گازی از آب نمک باقی مانده جدا می­شوند. این بلور­ها برای جدا­سازی آب نمک چسبیده به آن­ها شسته می­شوند. سپس بلور­‌ها ذوب­شده و گاز برای تزریق دوباره به اول خط بر­گردانده می­ شود[۱۲]
۱-۶-۱-۴-۳- جدا­سازی آنزیم­ها
از هیدرات گازی می­توان در جدا­سازی آنزیم­ها از محلول استفاده کرد. برای این کار از گاز‌­هایی شامل کلرو­دی­فلوئور­متان که یک گاز آب­دوست است و پروپان که یک گاز آب­گریز است، استفاده می­ شود. آنزیم­‌هایی که مورد بررسی قرار گرفتند شامل آنزیم سیتو­کروم که آب­گریز است و از قلب اسب گرفته می­ شود، و α-سیتوتیپسین است که آب­دوست بوده و از پانکراس گاو گرفته می­ شود.
گاز با فشار بالا به محلول شامل آنزیم رانده می­ شود. واکنش هیدرات گازی به دلیل فوق اشباع محلول، باعث ته­نشین شدن آنزیم می­ شود [۱۳].
هیدرات­‌های گازی علاوه بر فوایدی که دارند، دارای مضراتی هم هستند که در بخش بعدی به آن­ها پرداخته شده است.
۱-۶-۲- مضرات هیدرات گازی
تشکیل هیدرات گازی در خطوط لوله­‌ی انتقال گاز باعث جلوگیری از انتقال گاز و انسداد خطوط لوله می­ شود. لذا باید از تشکیل هیدرات­‌های گازی جلوگیری شود، زیرا هزینه­‌های گرفتگی به سبب تشکیل هیدرات، بالا و فرایند کار طولانی مدت است. از دیگر مضرات هیدرات می­توان به اثرات اقلیمی اشاره کرد، بدون وجود فشار نسبتاً زیاد و دما­ی کم،هیدرات­های گازی تجزیه شده وگاز متان را وارد اتمسفر می­ کند. از آن جایی که اثر گلخانه­ای گاز متان ده برابر گاز دی­اکسید­کربن است، نقش این گاز در گرم شدن کره­ی زمین باید کاملاً جدی گرفته شود. امروزه دانشمندان سعی می­ کنند برخی از علل تغییرات آب و هوایی را که تا به­حال ناشناخته باقی مانده است، با هیدرات­های گازی توضیح دهند. بنا به نظر محققین پایین آمدن سطح آب دریا­ها باعث شد که فشار ایجاد شده توسط آب بر­روی رسوب­های حاوی هیدرات­های گازی که خارج از ناحیه قطب قرار داشتند کم شود. در این صورت متان آزاد شد و به اتمسفر راه یافت و باعث شدت یافتن اثر گلخانه­ای و در نتیجه گرم شدن آب و هوا شد. نقش هیدرات­های گازی در تغییرات آب و هوایی به ما امکان می­دهد که بتوانیم علت پایان گرفتن سریع برخی از دوران یخبندان را توضیح دهیم.
۱-۷- بازدارنده­ها
تشکیل هیدرات­های گازی در خطوط لوله انتقال گاز باعث جلوگیری از انتقال گاز و انسداد خطوط لوله می شود. از آن جا که هزینه­ های گرفتگی لوله توسط هیدرات­های گازی زیاد است و این فرایند مرتباً تکرار می­ شود، لذا باید از تشکیل آن­ها جلوگیری شود.
برای جلوگیری از تشکیل هیدرات چهار روش وجود دارد:

مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند این شرکت مطابق با انتظارات من است. مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند من تقریباً از همه چیز این کارگزاری رضایت دارم. مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند من از این کارگزاری به نسبت شرکت­های دیگر راضی هستم. مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند من از خدمات این شرکت دوباره استفاده خواهم کرد. مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند من این شرکت را به دوستانم توصیه خواهم کرد. مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند اگر خواهان خدمات باشم تمایل به استفاده از خدمات این شرکت را دارم. مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند مدیران شرکت پیشنهادهای خوبی برای رفع نیازهای ما ارائه می­ دهند

شاهان هخامنشی بنا به سنت آسیای غربی – مدیترانه ای ، حافظ این مظهر گیاهی بودند ، به عقیده فریزر تنها تفاوت در این است که این درخت در ایران مظهری زرین داشت و در دربار نگهداری می شد . بسیاری از شرق شناسان مجموعه کاخ های تخت جمشید را به مثابه باغ سنگی زیبا و یا یک بیشه مقدس تصور کرده اند ، زیرا در نقش برجسته های آنجا هم با درختان « نخل و سرو » سر و کار داریم و هم اینکه ستون های کاخ ها تداعی کننده درختان هستند . در زمان هخامنشیان در ایران زمین « پایری دئزه » ها یا فردوس ها ، باغ های بزرگ و پر شکوهی بودند که شهرت بسیار داشتند . به نقل از مورخان یونانی ، آنها مکان هایی بودند با درختان انبوه و تناور که آب در میان آنها روان بوده و چهارپایان بسیار در آنها پرورش می یافتند . ۵-۶-۴ نخل : درخت نخل نماد حاصلخیزی در مصر و بین النهرین به شمار می آید . نخستین تصویرهای درخت مقدس را با تصویری از نخل نشان داده اند . در مصر درخت نخل نماد افزایش محصولات بود و به طور کلی به هراه پاپیروس ، علامات اشرافی مصر علیا و سفلا را تشکیل می داد . درخت نخل در نزد خدای خورشید «رع» ، مقدس بود و به عنوان جایگاه او به شمار می آمد . همچنین بعدها در فرهنگ مسیحی ، نخل نشانه مریم عذرا در بکرزایی مقدس و نشانه اغلب شهیدان عیسوی است . نخل همیشه راست می روید و هرگز شاخ و برگش نمی ریزد و دائماً سرسبز است .[۲۶۰] ۵-۶-۵ گل نیلوفر در نگاره های تخت جمشید : گل نیلوفر یا گل خورشید قبل از هخامنشیان دارای سابقه و احترام بسیار بود تا جاییکه نقش آن بر حاشیه پیاله ها ( پیاله طلایی املش) ، ظروف سفالی نقش دار سیلک ، دسته خنجر (دسته خنجر لرستان) و دیوار نگاره های تخت جمشید ، شوش و … دیده می شود . استمرار این نقش ورجاوند و مقدس بر جام ها و ساغرهای زرین ، بر حواشی جامه های هخامنشیان ، بر ستون های تخت جمشید و در دست شاهان هخامنشی ( شاخه گل نیلوفر نمادی از صلح و زندگی) و در دست بسیاری از نمایندگان ملل ( در نقوش برجسته تخت جمشید ) به نشانه شادباش ، همگی بازگو کننده اعتقاد و احترام به این گیاه و هدیه اهورایی است . در اساطیر کهن ایرانی گل ناهید (آناهیتا) ، تصور اصلی مادینه هستی در روایات دینی ایران قدیم بوده است ، که از جهاتی با معتقدات هندیان باستان مشابه است . جنبه تقدس نیلوفر به محیط آبی آن برمی گردد. گل نیلوفر مظهر تجدید حیات شمسی به شمار می رود . نیلوفر نماد کمال است ، زیرا برگ ها ، گل ها و میوه اش دایره ای شکل هستند و دایره خود از این جهت که کامل ترین شکل است نماد کمال به شمار می آید . نیلوفر یعنی شکفتن معنوی . زیرا ریشه هایش در لجن است و با این حال به سمت بالا و آسمان می روید . از آب های تیره خارج می شود و گل هایش زیر نور خورشید و روشنایی آسمان رشد می کنند . نیلوفر کمال زیبایی نیز به شمار می رود . ریشه های نیلوفر مظهر ماندگاری و ساقه اش نماد بند ناف است که انسان را به اصلش پیوند می دهد و گلش پرتو خورشید را تداعی می کند . نیلوفر نماد انسان فوق العاده یا تولد الهی است . [۲۶۱] بخش هفتم ۷-۱ ماه : برای بررسی مذهب و اعتقادات هخامنشیان و نقش ماه در آن بایستی از منابع محدود مفیدی که در دست است چون کتیبه های شاهان هخامنشی و نوشته های مورخین گذشته و مورخین جدید و نیز نقش روی سکه ها ، مهرها و سفال ها و بناهای به جا مانده از این عهد بهره گرفت . به طور کلی چه در عهد این پادشاهان و چه نزد سلسله های بعدی تا قبل از ساسانیان حتی آنها که زرتشتی بودند تعصب دینی وجود نداشته و نوعی آزادمنشی و بی نظری در مسائل دینی حکمفرما بوده است . چنانچه به سکه ها ، مهرها و سفال ها و بناهای به جای مانده از این عهد مراجعه نمائیم و به بررسی نمادهای نقش شده بر روی آنها بپردازیم جنبه های دیگری از مذهب هخامنشیان نیز برایمان روشن می شود . منجمله اینکه در عهد این پادشاهان نیز همانند گذشتگان ایشان ماه همواره ستایش شده است . روی یک مهر هخامنشی حیوانی نقش شده است که قسمت جلوی بدن او گاو است ، ادامه تن او عقرب و آخر به گرازی منتهی می شود . سر انسان دارد با صورتی ریش دار . پشت او درخت نخلی قرار گرفته است . مهر دیگر نقش خدای ریش دار ماه را دارد در حالی که شاه و یا مظهر خدای آسمان را که در هلال قرار گرفته روی دست نگاه داشته است . برخی از مهرهای هخامنشی منقش به شبه ابوالهولی است که هم گویای تقدس ماه است در این دوران و هم بیانگر تداوم پیوند ماه با گاو و آن نقش گاو ریش داری است که صورتش شبیه قرص ماه است و روی برخی از مهرها بال هم دارد . همین گاوهای ریش دار و بال دار با سرهای انسانی که تجسم ماه هستند به مثابه پاسداران کاخ شاهان هخامنشی بر مدخل دروازه خشایارشا در تخت جمشید قرار دارند . حضور قاطع صلیب ماه بر روی بنای آرامگاه داریوش در نقش رستم نیز به چشم می خورد . [۲۶۲] گاه شاه با حیوانی گلاویز شده است که نمادهای ماه و خورشید و آسمان همه را در خود دارد . جلوی بدن شیر است که شاخ گاو ، پا و چهار بال عقاب و دم عقرب دارد و بیانگر گذشت زمان است . صحنه دیگر بر روی یک مهر شاه را نشان می دهد که با دو شیر نبرد می کند در حالی که شخصی جلوی نماد آسمان مشغول انجام مراسم مذهبی است و مقابل او هلال ماه قرار دارد . در تمام قسمت های قصر هخامنشیان در تخت جمشید نمادهای ماه و خورشید به همراه هم و گاه جدا از یکدیگر به چشم می خورند . ابوالهول های نگهبان کاخ تاج نیلوفر آبی به سر دارند که نماد خورشید است و بر آجرهای لعابی شوش طرح نیلوفر آبی به چشم می خورد همچنان که طرح دو پیچک از طرح های متعلق به ماه نیز دیده می شود . سریر سلطنت داریوش را تعداد بیست و هشت یا سی نفر بر روی دست دارند که با تعداد روزهای قمری و یا شمسی مطابقت دارد . خورشید از زمان هخامنشیان و تا حدودی قبل از ایشان در اعتقادات مردم این سرزمین قاطعیت و تداوم یافت تا به جائی که ایرانیان مهرپرست نیز خوانده شده اند . از مسایل قابل توجه در این دوره درفش ایرانیان است . «درفش ایرانیان در ابتدای دوره هخامنشی هلال و درفش یونانیان خورشید بوده است . عجیب است که در کتاب هرودوت نیز ما به یک عبارتی برمی خوریم که این نظریه را تایید می کند . چون خورشیبد برای یونانیان پیش گوئی می کند و ماه برای ایرانیان لذا گرفتن خورشید برای یونانیان نشانه بدی است نه برای ایرانیان » . این نکته بیانگر صمیمیت و ارتباطی است که بین ایرانیان در ابتدای دوره هخامنشی با ماه برقرار بوده است ، که البته چنانچه دیدیم بعدها در زمان خشایارشا و اردشیر خورشید عظمت و اعتبار بسیاری یافت و در کتیبه ها نامش آمده است . درفش ایرانیان در دوره باستانی خورشیدی بود که بالای آن ماه قرار داشته است . بنفش رنگ برخی از پرچم های ایرانیان منجمله درفش کاویانی است . از آنجا که بسیار دیده شده رنگ نیلی به ماه تعلق دارد شاید کبودی پرچم های باستانی ایرانیان نیز با ماه بی ارتباط نباشد .[۲۶۳] [۲۶۴] سایت www. Aryapersia3d. parsihiog .com نتیجه گیری : دوران پادشاهی هخامنشیان یکی از عظیم ترین و درخشان ترین دوران تاریخ ایران باستان می باشد . آثار مختلفی ازاین دوران باقی مانده است که با دقت و کاوش درآنها می توان به شناخت روشنی از آن زمان دست یافت . از آثار باقی مانده می توان به نقوش تخت جمشید اشاره کرد . قسمتی ازاین حجاری ها نمایانگر اقوامی می باشد که درحال انتقال هدایا و پیشکش های خود به دربار هخامنشی میباشند . دراین پایان نامه توانستیم با بررسی این نقوض و شناختی از تعداد و اصلیت اقوام افرادی که حامل هدایا هستند دست پیدا کنیم . حیوانات و هدایای دیگر این افراد نشان دهنده نوع اقلیم فرهنگ و تمدن آنها بوده است . نوع پوشش و البسه آنها هنر و فرهنگ اقوام را به ما نشان داده است . وجود نگاره های دیگر از جمله نیلوفر ف نخل ، ماه و دیگر سمبل ها حاکی ازاعتقادات آن دوره از جمله حیات مجدد ف زیبایی ف کمال و حاصلخیزی می باشند . ازچهره های گشاده و با آرامش افراد می توان دریافت که در آن دوره پرعظمت پادشاهی هخامنشی با عدالت موجود اقوام با صلح و آرامش درکنار هم می زیسته اند وهمگی با رضایت و خوشحالی ناشی از صلح حاکم بر سرزمینشان درحال اهدای پیشکش های خود می باشند و هیچ گونه نشانه ای از وجود جبر مبنی بر اینکه کالاها نوعی خراج و باج می باشند یافت نمی شود . وهمگی از بهترین حیوانات و محصولات کشاورزی و معدنی و آثار هنری خود بعنوان تحفه و هدیه به دربار شاهنشاه عظیم هخامنشی تقدیم می نمایند . فهرست منابع ۱- استرابون ؛ ۱۳۸۲ ، جغرافیایی استرابو ( سرزمین های زیر فرمان هخامنشی ، ) بنیاد موقوفات دکتر افشار ، تهران ، چاپ اول . ۲- بطلمیوس ؛ ۱۳۸۳ ، ایرانشهر در جغرافیای بطلمیوس ، پژوهش یوزف مارکوارت ، مریم میراحمدی ، طهوری ، تهران ، چاپ اول . ۳- گزنفون ؛ ۱۳۸۰ ، کوروش نامه ، رضا مشایخی ، علمی – فرهنگی ، تهران ، چاپ سوم ، ص ۲۲۰ . ۴- هرودوت ؛ ۱۳۸۶ ، تواریخ ، وحید مازندرانی ، دنیای کتاب ، تهران ، چاپ سوم ، ص ۴۰۱ . فهرست مآخذ : ۵- احسانی ، محمد تقی : هفت هزار سال هنر فلزکاری در ایران ، علمی و فرهنگی ، تهران ، چاپ سوم ۶- اسلامی ، ندوشن ، محمد علی ؛ ۱۳۷۳ ، ایران و یونان دربستر باستان ، علمی و فرهنگی ، تهران ، چاپ اول ۷- انصاری ، جمال ؛ ۱۳۸۶ ، تاریخ فرهنگ ایران از آغاز تا پایان عصر پهلوی ، سبحان نور ، تهران ، چاپ اول ۸- اومستد ، ۱۳۸۳ ، هخامنشیان ، محمد مقدم ، علمی و فرهنگی ، تهران ، چاپ سوم ۹- بابلون ، ارنست ؛ ۱۳۸۸ ، سکه های ایران در دوره هخامنشیان ، ملکزاده بیاتی ، پازینه ، تهران ، چاپ اول . ۱۰- باقری ، مهناز ؛ ۱۳۸۹ بازتاب اندیشه های دینی در نگاره های هخامنشی ، امیرکبیر ، تهران ، چاپ اول ۱۱- بختور تاش ، ن ؛ ۱۳۸۸ ، حکومتی که برای جهان دستور می نوشت ، بهجت ، تهران ، چاپ اول ۱۲- براند جورج ، فیلیپ ؛ ۱۳۸۸ ، امپراتوری جهانی ایران ، وحید عسگرانی ، امیرکبیر ، تهران ، چاپ اول . ۱۳- بدره ای ، فریدون ، ۱۳۸۴، کورش کبیر درقرآن مجیدوعهدعتیق ، اساطیر ، تهران ، چاپ اول ۱۴- بروسیوس ، ماریا ؛ ۱۳۸۸ ، شاهنشاهی هخامنشی ( از کوروش بزرگ تا اردشیر اول ) ، هایده مشایخ ، نشر ماهی ، تهران ، چاپ اول ۱۵- بریان ، پی یز ، ۱۳۸۶ ، وحدت سیاسی و تعامل فرهنگی درشاهنشاهی هخامنشی ، ناهید فروغان ، اختران ، تهران ، چاپ اول . ۱۶- بوسایلی ، ماریو ؛ ۱۳۷۶هنر پارتی و ساسانی ، یعقوب آژند ، نشر مولی ، تهران ، چاپ اول ۱۷- بهار ، مهرداد ؛ ۱۳۷۶ ، از اسطوره تا تاریخ ، نشر چشمه ، تهران ، چاپ اول . ۱۸- بهزادی ، رقیه ؛ ۱۳۸۳ ، درچشم انداز کهن تاریخ ایران ، طهوری ، تهران ، چاپ دوم

راهى که خود برپا و بحال طبیعى استقامت و تداوم دارد، و راه آن کسانیکه عیش و زندگى پاکیزه و طیب و خوشى روحى بآنان داده، و غضب و تندى در باره آنان واقع نشده، و از راه حقّ و مستقیم گمراه نیستند.(۷) کتاب ترجمه تفسیر المیزان: ما را بسوى صراط مستقیم هدایت فرما. (۶) صراط آنان که برایشان انعام فرمودى. نه آنان که برایشان غضب کردى. و نه گمراهان (۷) ترجمه آقای فولادوند: به راه راست ما را راهبر باش، (۶) راه آنهایى که برخوردارشان کرده‏اى، همانان که نه درخور خشم‏اند و نه گمگشتگان. (۷) ترجمه آقای مکارم شیرازی: ما را به راه راست هدایت کن … (۶) راه کسانى که آنان را مشمول نعمت خود ساختى نه کسانى که بر آنان غضب کرده‏اى و نه گمراهان.(۷) مقایسه: استاد مصطفوی در ترجمه دو آیه آخر برخلاف دیگر ترجمهها که یا «صراط» را معنا نکرده و یا فقط معادل «راه» را برای آن برگزیدهاند، بر اساس اصل الواحد «صرط»[۲۶۲] در معنای صراط، «راه روشن وسیعی که جهت مادّى و معنوى زندگی را دربرمیگیرد» مد نظر قرار داده است. همچنین بر مبنای اصل الواحد «قوم»[۲۶۳] و معنای باب استفعال[۲۶۴] در ترجمه خود از کلمه «مستقیم» وصف « به صورت طبیعى برپا و تداوم داشتن» را ارائه داده است. علت بیان ویژگی «عیش و زندگى پاکیزه و طیب و خوش روحى» برای عبارت «انعمت علیهم» در تفسیر روشن، توضیح اصل الواحد «نعم» در التحقیق است که در معنای جامع این مادّه «طیب عیش و حسن حال» را در نظر گرفته است.[۲۶۵] جمع بندی از مقایسه ترجمه ها در سوره مبارکه حمد در این قسمت ترجمه ارائه شده از سوره حمد در تفسیر روشن و چند ترجمه رایج از نظر گذشت. مقایسهای که با محوریت معنای لغات بیان شده در این کتب بین تفسیر روشن و سایر کتابها انجام شد، نشان میدهد ترجمه استاد مصطفوی ترجمهای تفصیلی از سوره است و اکثر لغات مهم این سوره بر مبنای اصل الواحدهای بیان شده برای آنها در التحقیق فی کلمات القرآن الکریم معنا شدهاند. همین امر منجر شده این ترجمه بتواند بیشتر از سایر ترجمهها در انتقال مراد خدای تعالی به خواننده گویا باشد. البته در این میان لغاتی هم هستند که در آنها استاد به بیان معنای اولیه و کلی همانند سایر ترجمهها اکتفا کرده است و دقتی که در التحقیق شده است در این ترجمه دیده نمیشود مانند کلمات «رب»[۲۶۶] و «هدایت»[۲۶۷]. در نهایت میتوان گفت هر جا که استاد بر مبنای اصل الواحد و معنای ارائه شده در التحقیق به شرح کلمات پرداخته است، معنا از دقت بیشتری نسبت به سایر ترجمهها برخوردار است اما در سایر موارد که استاد به ارائه معنایی کلی اکتفا کرده منجر شده بین ترجمه تفسیر روشن از قرآن کریم و سایر ترجمهها اختلاف برجستهای مشاهده نشود. سوره مبارکه طور در قسمت قبل مقایسه سوره مبارکه فاتحه الکتاب با چندین ترجمه رایج از نظر گذشت. در ادامه این کار برای سوره مبارکه طور نیز انجام شده است. اما در عین حال برای جلوگیری از اطاله کلام، نتیجه مقایسه به صورت خلاصه وار بیان میشود. در این مقایسه تعداد قابل توجهی از آیات ترجمه تفسیر روشن با سایر ترجمهها اختلاف چشمگیری نداشتند برای همین این مجموعه آیات در متن حذف شدهاند. ترجمه آقای مکارم شیرازی نیز در مقایسه اولیه مورد توجه قرار گرفت، اما به دلیل نزدیکی به دو ترجمه دیگر در مقایسه ارائه شده آورده نشده است. همچنین برای گویایی بیشتر و امکان مقایسه بیشتر آیات و ترجمهها، مقایسه در نمای جدولی ترسیم شده است. طبق عنوان سرستونها محتویات جدول از این قرار است: در ستون اول آیات سوره مبارکه طور، سپس ترجمه تفسیر روشن، ترجمه از کتاب ترجمه تفسیر المیزان، ترجمه آقای فولادوند و در آخرین ستون نکات حاصل از مقایسه آمده است. جدول مقایسه ترجمههای سوره مبارکه طور آیات تفسیر روشن ترجمه المیزان ترجمه فولادوند مقایسه بِسْمِ اللَّهِ الرَّحْمنِ الرَّحیمِ‏ توضیح آن در سوره مبارکه حمد آمد. وَ الطُّورِ (۱) سوگند به جبل طور، طور: نام جبلى است که حضرت موسى در بالاى آن مناجات میکرد. سوگند به کوه طور (۱). سوگند به طور، (۱) منظور از جبل طور شرح داده شده است. وَ کِتابٍ مَسْطُورٍ (۲) و به کتابی که نوشته شده و آسمانی است‏. کِتابٍ مَسْطُورٍ: کتابی که نوشته شود با نظم و ترتیب، و این معنى اعمّ است از ترتیب ظاهرى، و یا معنوى و آسمانى. و کتاب نوشته شده (اى که در این کوه نازل شد) (۲). و کتابى نگاشته شده، (۲)